Trượt hướng dẫn gắn kết
Trước khi bạn bắt đầu quá trình chuẩn bị slide, đảm bảo bạn đã thu thập tất cả các vật liệu cần thiết, bao gồm các slide, nắp đậy, giọt nước hoặc ống, và bất kỳ hóa chất hoặc vết bẩn nào bạn dự định sử dụng.
Có hai loại slide chính mà bạn sẽ làm việc với:
1. Trượt kính phẳng tiêu chuẩn.
2. Trầm cảm hoặc trượt tốt, có một giếng nhỏ hoặc thụt vào trung tâm của nó được thiết kế để giữ một giọt nước hoặc chất lỏng. Đây thường là những thứ đắt tiền hơn và thường được sử dụng mà không cần trượt.
Các slide tiêu chuẩn có thể được làm bằng nhựa hoặc thủy tinh, có kích thước 1 x 3 inch (25 x 75 mm) và độ dày 1 đến 1,2 mm.
Đối với các slide ướt, một tấm bìa hoặc kính che là rất cần thiết. Đây là một mảnh thủy tinh (hoặc nhựa) cực mỏng, được định vị cẩn thận trên giọt mẫu. Nếu không có nắp, sức căng bề mặt sẽ khiến giọt nước tạo thành hình vòm. Các bộ đệm có độ căng này, đảm bảo mẫu nằm phẳng để kiểm tra chính xác với sự tập trung tối thiểu. Hơn nữa, nắp hoạt động như một biện pháp bảo vệ, ngăn chặn ống kính khách quan can thiệp vào việc thả mẫu.
Kính hiển vi trượt
Gắn kính hiển vi đề cập đến các phương pháp được sử dụng để bảo vệ các slide hoặc mẫu vật kính hiển vi để quan sát. Chủ yếu có bốn loại:
1. Trò chơi trượt:Đây là những loại phổ biến nhất và liên quan đến việc đặt một mẫu vật trên một phiến kính phẳng, thường sử dụng môi trường lắp (như chất lỏng hoặc gel) để giữ nó tại chỗ. Sau đó, một tấm bìa được thêm vào để bảo vệ mẫu vật và cung cấp một bề mặt phẳng để xem.
2.Các slide này có một giếng nhỏ hoặc trầm cảm ở trung tâm, được thiết kế để chứa một giọt chất lỏng, chẳng hạn như nước hoặc chất lỏng lắp chuyên dụng. Chúng được sử dụng khi làm việc với các mẫu vật yêu cầu ngâm trong chất lỏng.
3. Núi tạm thời:Những giá treo này không có nghĩa là để lưu trữ hoặc quan sát lâu dài. Chúng liên quan đến các phương pháp đơn giản và nhanh chóng như đặt một mẫu vật trên một slide với một giọt nước. Chúng thường được sử dụng để quan sát các sinh vật sống hoặc các mẫu nhạy cảm với thời gian.
4. Giá treo vĩnh viễn:Chúng được thiết kế để lưu trữ và quan sát lâu dài. Chúng liên quan đến các quy trình phức tạp hơn, bao gồm cả việc sử dụng phương tiện gắn chuyên dụng cứng theo thời gian, đóng gói mẫu vật trong môi trường trong suốt. Loại gắn kết này thường được sử dụng cho các slide giáo dục và nghiên cứu khoa học.
Mỗi loại gắn kết có các ứng dụng cụ thể của nó và được chọn dựa trên bản chất của mẫu vật và mục đích của quan sát.
Bốn cách phổ biến để gắn một tấm kính hiển vi
Có một số phương pháp phổ biến để gắn một slide kính hiển vi, tùy thuộc vào loại mẫu vật và mục đích quan sát. Dưới đây là bốn cách phổ biến để gắn một slide kính hiển vi:
Lắp khô:
Quy trình: Trong phương pháp này, một mẫu vật được đặt trực tiếp lên một slide kính hiển vi khô, sạch. Nó thường được sử dụng cho các mẫu vật không cần thêm độ ẩm hoặc ngâm trong chất lỏng.
Ứng dụng: Nắp khô phù hợp để quan sát các mẫu vật rắn như các bộ phận thực vật, tóc hoặc khoáng chất.
Gắn ướt:
Quy trình: Một giọt chất lỏng nhỏ (thường là nước hoặc chất lỏng gắn chuyên dụng) được đặt trên slide, và mẫu vật sau đó được thêm vào giọt này. Một tấm che phủ được đặt nhẹ nhàng trên mẫu vật để tránh làm khô và biến dạng.
Các ứng dụng: Giá treo ướt được sử dụng để quan sát các sinh vật, tế bào hoặc mẫu vật sống cần ngâm trong chất lỏng.
Gắn bí:
Quy trình: Kỹ thuật này liên quan đến việc đặt một mẫu vật trên một slide và sau đó nhẹ nhàng nhấn nó xuống bằng một tấm bìa hoặc một slide khác để làm phẳng nó. Điều này thường được sử dụng cho các mô mềm hoặc các bộ phận thực vật tinh tế để tạo ra một lớp mỏng, trong suốt để quan sát.
Ứng dụng: Giá treo bí được sử dụng để kiểm tra các mô, đặc biệt là trong sinh học thực vật.
Chứng gắn phết tế bào:
Quy trình: Một lượng nhỏ mẫu vật (thường là chất lỏng hoặc chất bán lỏng) được trải đều và đều trên một slide, thường sử dụng cạnh của một slide khác. Sau đó, nó được phép làm khô không khí hoặc có thể được cố định bằng một tác nhân hóa học.
Ứng dụng: Kh gắn cái nhòe thường được sử dụng để quan sát các vi sinh vật như vi khuẩn hoặc để chuẩn bị bôi trơn máu cho kính hiển vi.
Các phương pháp này phục vụ cho các loại mẫu vật khác nhau và các yêu cầu cụ thể của chúng để quan sát. Việc lựa chọn kỹ thuật gắn kết phụ thuộc vào các yếu tố như bản chất của mẫu vật, mục đích quan sát và mức độ chi tiết và rõ ràng mong muốn.
Vết kính hiển vi
Vết bẩn kính hiển vi, còn được gọi là vết bẩn sinh học hoặc thuốc nhuộm, là các chất được sử dụng trong kính hiển vi để tăng cường độ tương phản và khả năng hiển thị của mẫu vật sinh học. Chúng hoạt động bằng cách liên kết có chọn lọc với các thành phần tế bào cụ thể, chẳng hạn như protein, axit nucleic hoặc lipid, cho phép hình dung và biệt hóa dễ dàng hơn của các cấu trúc tế bào. Dưới đây là một số loại vết bẩn kính hiển vi phổ biến:
1. Hematoxylin và Eosin (H & E):
Loại: Vết bẩn kết hợp.
Sử dụng: Một trong những vết bẩn được sử dụng rộng rãi nhất trong mô học, hematoxylin làm bẩn hạt nhân tế bào màu xanh tím, trong khi eosin nhuộm tế bào chất và một số cấu trúc ngoại bào màu hồng.
2. Methylene Blue:
Loại: Thuốc nhuộm cơ bản.
Sử dụng: Vết bẩn hạt nhân tế bào màu xanh. Nó thường được sử dụng cho các nghiên cứu về tế bào học và vi sinh nói chung.
3. Giemsa:
Loại: Vết bẩn kết hợp.
Sử dụng: Được sử dụng để nhuộm các tế bào máu, nó phân biệt các thành phần hạt nhân và tế bào chất trong một loạt các màu, cho phép xác định các loại tế bào khác nhau.
4. Gram Stain:
Loại: Vết bẩn kết hợp.
Sử dụng: phân biệt giữa hai loại vi khuẩn chính: gram dương (giữ lại vết tím pha lê) và gram âm (chiếm đối nghịch với safranin).
5. Vết bẩn của Wright:
Loại: Vết bẩn kết hợp.
Sử dụng: chủ yếu được sử dụng để làm mờ máu, vết bẩn này cho phép biệt hóa các loại tế bào máu và xác định các bất thường.
6. Lugol's iốt:
Loại: Vết bẩn dựa trên iốt.
Sử dụng: Được sử dụng cùng với iốt gram, nó có thể được sử dụng để tăng cường độ tương phản của các cấu trúc tế bào nhất định.
7. Dầu đỏ O:
Loại: Thuốc nhuộm lipophilic.
Sử dụng: Liên kết cụ thể với lipid, làm cho nó hữu ích cho việc nhuộm các cấu trúc như các giọt chất béo trong các tế bào.
8. Axit định kỳ-Schiff (PAS):
Loại: Vết bẩn dựa trên phản ứng hóa học.
Sử dụng: Phản ứng với carbohydrate, làm nổi bật các cấu trúc như glycogen, mucin và các glycoprotein khác.
9. Toluidine Blue:
Loại: Thuốc nhuộm cơ bản.
Sử dụng: Vết bẩn các thành phần axit trong các tế bào và mô, bao gồm các hạt tế bào mast và axit nucleic.
10. Safranin:
Loại: Thuốc nhuộm cơ bản.
Sử dụng: Được sử dụng như một phản đối trong nhuộm gram để màu vi khuẩn gram âm.
Đây chỉ là một vài ví dụ, và có nhiều vết bẩn chuyên dụng khác được sử dụng cho các mục đích cụ thể trong kính hiển vi, chẳng hạn như các vết bẩn đặc biệt cho các mô liên kết, sợi thần kinh hoặc cấu trúc tế bào cụ thể. Việc lựa chọn vết bẩn phụ thuộc vào loại mẫu vật và thông tin cần thiết từ kiểm tra kính hiển vi.
Các bước nhuộm kính hiển vi
1. Bắt đầu bằng cách chuẩn bị một slide Mount ướt, định vị mẫu vật của bạn trên một slide kính hiển vi sạch.
2. Sử dụng một giọt mắt hoặc pipet, thu thập cẩn thận một giọt vết bẩn được chọn.
3. Đặt giọt vết bẩn này lên cạnh ngoài của phiếu bìa của bạn, đảm bảo nó tiếp xúc với cạnh của slide.
4. Để tạo điều kiện cho sự phân bố chẵn của vết bẩn, đặt một miếng khăn ăn hoặc khăn giấy dọc theo phía đối diện của tấm bìa, ấn chắc chắn vào cạnh.
5. Nếu cần, áp dụng một vết bẩn bổ sung để đảm bảo phạm vi bảo hiểm đầy đủ của mẫu vật của bạn.
6. Trượt của bạn hiện đã được chuẩn bị đầy đủ để quan sát dưới kính hiển vi.
